一起學(xué)習(xí)下緩沖液的配制及其保存方法

　　生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖液主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng)，生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。
 

　　硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖。
 

　　檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合，所以存在有鈣離子的情況下不能使用。
 

　　磷酸鹽：在有些實(shí)驗(yàn)，它是酶的抑止劑或甚至是一個(gè)代謝物，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來(lái)。而且它在pH7.5以上時(shí)緩沖能力很小。
 

　　三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用，但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點(diǎn)時(shí)溫度效應(yīng)。這點(diǎn)往往被忽視，在室溫pH是7.8的Tris緩沖液，4℃時(shí)是8.4，37℃時(shí)是7.4，因此，4℃配制的緩沖液在37℃進(jìn)行測(cè)量時(shí)，其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下，其緩沖能力極為不理想。
 

　　緩沖液的配制及其保存：
 

　　1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)保存在干燥的地方，如混合磷酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在空氣濕度較大時(shí)就會(huì)發(fā)生潮解，一旦出現(xiàn)潮解，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)即不可使用。
 

　　2.配制標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用二次蒸餾水或者是去離子水。如果是用于0.1級(jí)pH計(jì)測(cè)量，則可以用普通蒸餾水。
 

　　3.配制標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用較小的燒杯來(lái)稀釋，以減少沾在燒杯壁上的標(biāo)準(zhǔn)液。存放標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的塑料袋或其它容器，除了應(yīng)倒干凈以外，還應(yīng)用蒸餾水多次沖洗，然后將其倒入配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液中，以保證配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確無(wú)誤。
 

　　4.配制好的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液一般可保存2—3個(gè)月，如發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時(shí)，不能繼續(xù)使用。
 

　　5.堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)裝在聚乙烯瓶中密閉保存。防止二氧化碳進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)溶液后形成碳酸，降低其pH值。